如何提高ADCC实验成功率？
抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) ，是生物机体通过抗体清除感染、癌变或衰老细胞的主要途径，也是目前抗体药物药效评价的重要手段之一。ADCC广泛应用于抗体新药研发和改造，仿制药开发和研发过程中抗体质量及功能的分析，同时在生物药和免疫调节药物的临床试验中，ADCC活性也是ex vivo检测指标之一。
我们都知道，单克隆抗体是由两条重链（H链）和两条轻链（L链）通过共价键和非共价键联合形成的生物大分子，每条链又由抗原结合部位(Fab)和恒定区(Fc)组成。抗体药物在体内主要有两类的生理活性：一是通过Fab识别并专一性结合抗原物质，同靶标抗原中和或促使细胞凋亡；该生理活性的作用依赖于抗体Fab与抗原的亲和力。二是抗体Fc可与 NK细胞（效应细胞）表面的FcγRIIIa(CD16)结合，介导 ADCC作用。因此，抗体Fab的修饰会影响抗体抗原的亲和力，从而改变抗体的中和效应；而抗体Fc的修饰也会对抗体的ADCC效应造成影响。
上图：ADCC效应示意图
研究发现，NK细胞表面的FcγRIIIa(CD16)具有遗传多态性，该多态性存在于近膜端IgG结合结构域第158位，缬氨酸(V)可被苯丙氨酸(F)取代。人IgG同FcγRIIIa-V158相比FcγRIIIa-F158与人具有更高的亲和力，可更有效介导 ADCC 作用，临床研究表明，FcγRIIIa基因多态性与肿瘤病人的预后有关。因此，FcγRIIIa-V158型NK细胞FcγRIIIa-F158型NK细胞更加有利于ADCC实验的开展，而FcγRIIIa-V158相比FcγRIIIa-F158基因频率较低，TPCS提供供体FcγRIIIa基因分型测试与筛选服务，研究者可选择FcγRIIIA-158V/V分型的PBMC或NK细胞分离服务以便或的良好的ADCC实验效果。
上图：TPCS供体FcγRIIIa基因分型测试与筛选服务部分数据
*Lot No仅供参考，联系我们获取最新数据信息
ADCC实验过程包括三个重要组成部分：抗体（单抗药物）、效应细胞（PBMC细胞或NK细胞）和靶细胞。靶细胞种类、效应细胞的选择与检测靶细胞活性是保证实验成功的关键。效应细胞的选择一般使用外周血单核细胞(PBMC)或自然杀伤细胞（NK细胞）。相比PBMC细胞作为效应细胞，NK细胞中抑制性免疫细胞比例更低，选择NK细胞通常可使ADCC效应作用更强。为了获得良好的实验数据，您可选择TPCS品牌PBMC分离服务进一步分离NK细胞或直接选择NK细胞分离服务。
受供体免疫状态影响，不同供体NK细胞比例差异较大，直接影响NK自PBMC的分离得率。为了降低不同供体免疫状态的影响，TPCS提供供体预筛服务-利用流式细胞术检测供体体内CD56+细胞比例，研究者可根据NK细胞比例需求挑选合适的供体进行PBMC分离服务。同时，TPCS提供除CD56+外多种免疫标志物预筛服务。
上图：142例TPCS新鲜PBMC分离服务中NK细胞比例
上图：206例TPCS冻存PBMC分离服务中NK细胞比例
上图：TPCS品牌ADCC预筛服务部分数据展示
面对近期严峻疫情形势，妙顺生物迅速吹响抗疫“集结号”，为了确保广大科研工作者项目顺利进行，TPCS持续为细胞治疗研发、抗体药物研发的科学家们提供免疫细胞分离服务，涵盖Leukopak、PBMC、T细胞、NK细胞、单核细胞等细胞分离服务，欢迎来电咨询。联系方式：021-64169739。
妙顺（上海）生物科技有限公司（Milestone Biotechnologies ）作为民族品牌细胞服务商，开展进口替代工作，解决我国生物医药产业的“卡脖子”环节，致力于成为细胞与基因治疗领域内一站式服务提供商。TPCS是妙顺生物旗下细胞分离服务品牌，为用户提供免疫细胞分离服务、肝细胞分离服务及解决方案。原代细胞分离服务优势：依据项目需求提供样本解决方案、严格的样本分离和质检、提供样本冷链运输全程的温控记录。
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