优选hPBMC分离服务 | 辐照后细胞增殖及崩解实验验证

1985年Rosenberg教授在利用IL-2 治愈第一个病人后，他迅速意识到IL-2激活了一类免疫细胞。那么第一步就是在“案发现场”寻找武器，自然而然地开始在“肿瘤浸润细胞”中开始了实验。从1986年动物实验证明TIL有效，到1988年发表的第一个TIL临床试验结果，20个入组的melanoma病人中，11个有objective regression! 可以说肿瘤细胞治疗的伟大时代在那一刻开启了。

TIL（Tumor Infiltrating Lymphocytes，肿瘤浸润淋巴细胞）是一种从肿瘤组织中分离出的浸润淋巴细胞。这些淋巴细胞中有部分是针对肿瘤特异性突变抗原的T细胞，是深入到敌军内部打击能力最强的免疫细胞，被认为是一种机体对肿瘤细胞特异性免疫反应。

TIL疗法经过40年的沉淀积累，今年8月Iovance Biotherapeutics宣布向FDA递交了TIL疗法lifileucel的滚动上市申请；10月，Lyell Immunopharma宣布FDA已批准其TIL疗法LYL845的IND申请。TIL细胞药物的未来展现了更多可能性。

肿瘤中TIL的扩增通常分两个步骤进行，此过程的细节在不同的实验室之间有所不同，但是总体概念保持不变。

第一步，将肿瘤的小片段置于含有一种或多种刺激T细胞的生长因子的培养基中，最常见的方法是使用白介素2（IL-2）。第一步的长度是灵活的，以允许生成足够的细胞以启动该过程的第二步。

第二步是所谓的快速扩增方案（REP），其中第一步中收获的TIL在过量饲养细胞和T细胞刺激性生长因子的存在下通过触发其T细胞受体（TCR）复合物而诱导大量增殖。第二个扩增步骤通常需要2周左右的时间。REP可使用可溶的抗CD3抗体触发TCR，将辐照的外周血单个核细胞（PBMC）用作饲养细胞，并将IL-2用作T细胞生长因子。

• 外观标准：标签明确，标有服务编码及细胞基本信息；包装应完整，无液体渗漏；

• 微生物标准：仪器培养法无菌检测结果阴性；支原体检测结果阴性；HBV、HCV、HIV、TP、HTLV、B19、EB病毒检测结果阴性；

• 细胞纯度标准：单个核细胞占总细胞比例≥90%；

• 细胞活率标准：双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞活率≥90%；

• 细胞数目标准：双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞数目≥细胞标签规格；

• 崩解测试：复苏培养 14天，细胞残留率<10%；

• 流式细胞术检测数据。